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藏药材“独一味”组培快繁技术

来源:    作者:     发布日期:2015-11-20

技术概述:本药材组织培养用的材料取自地上部分,也有地下部分。埋在土中的带有大量的病菌,这是达到无菌组织培养的一大障碍。消毒是为了消灭病菌,以保证无菌组织培养的进行。但同一种药材植物不同部位的组织有其不同的特点,同一浓度的消毒剂不同时间的处理其敏感反应也不同。所以要进行摸索试验,以达到最佳的消毒效果。一方面既要把材料上的病菌消灭,同时又不损伤组织材料,而不影响其生长。

增产增效情况:利用组培技术来繁殖生产藏药材,能够按人们意愿去繁殖和生产所需的药材,来满足人们的需要,为人类造福。藏药材组织离体培养不仅是一种快繁手段,同时也是药材改良,种质保存和生产的理想途径。采用组织培养技术可大大缩短繁殖周期,降低成本,一年可繁殖数万株种苗,效益十分显著。利用组培技术生产藏药材不受地区、季节和气候的限制,便于产业化生产,将解决藏药材供需矛盾,缓解西藏濒危药材资源开发与保护之间的矛盾起到积极的作用。

技术要点:

1、取材、消毒、接种及培养条件:将根、茎、腋芽灭菌时取活体植株,并切成3—4厘米节段,置于洗涤溶液中用毛刷洗净,然后取出再用清水冲洗1—2个小时,在超净工作台上用75%酒精消毒,再转入0.1升汞溶液中灭菌后,倒去灭菌液,再用无菌水冲洗4—5次。沥干水后将材料切成1厘米的节段,垂直地接种到诱导培养基上。种子灭菌时,用清水将种子洗净,然后用75%的酒精浸泡,在过滤纸上沥干后,将种子均匀接入诱导培养基上。叶片灭菌时,取独一味幼嫩叶片,用脱脂棉将叶片擦拭干净后在超净工作台上用75%酒精过一遍,用无菌水冲洗2—3遍;沥干水后,将叶片切成0.5厘米长的切段并接入诱导培养基上。以上材料的诱导培养阶段,培养室的温度均在22℃±2,每天日光灯照明12小时,光照强度2000勒克司,晚间黑暗。

2、初代培养:要成功地建立初代培养,首先一定要选择好药材的部位,其次一定要选择好合适的培养基,激素及其他添加物,还要掌握适宜的培养条件。经过多次试验,初代培养所用的培养基以MS附加生长素为好。但不同外植体诱导的发芽率也有区别。

3、继代培养:继代培养的目的是繁殖大量有效的芽与苗,其方法是通过初代培养的药材在无菌条件接种,选择好适宜的培养基和培养条件,使试管苗扩繁至所需要的数量。

4、生根培养:芽长高至1.5厘米以上时,从基部剪下接到生根培养基中。生根培养基为1/2MS和MS培养基,附加IBA、IAA和NAA,均能生根。

5、试管苗温室炼苗与移栽:通过试验得出独一味试管苗的移栽既可用有根苗(完整试管苗)移栽,也可用无根试管苗移栽,两种方法各有其优缺点。(1)独一味试管苗无根苗移栽:先将具有2—4片叶的小苗移至附加有低浓度生长素的MS培养基上培养20—25天,然后将其移出洗净,插入土质疏松,保水性能好,排灌方便的土壤中,移栽后两周内加盖塑料薄膜保湿,温度控制在20—30℃范围,湿度在90%左右。在此条件下,移栽后15天左右开始发根。移栽成活率达98%。(2)独一味试管苗有根苗的移栽:当独一味试管苗在生根培养基上形成了良好根系时,可将生根苗移栽到土质疏松,保水性能好的土壤中。移栽后最初一周覆盖塑料薄膜保湿,温度控制在30℃以下。移栽成活率可达到100%。

注意事项:

1、要求土质疏松肥沃,含有机质较多。

2、采用无根苗移栽方法的优点是省略生根培养这一不,降低了生产成本;其缺点是无根苗移栽后停顿生长两周左右,然后随着根系的形成又恢复生长。移栽独一味有根小苗的优点是小苗恢复生长快,其缺点是增加了诱导生根培养,成本有所提高。

适宜区域:该技术适宜在我区拉萨、日喀则、山南、林芝等地海拔2700米—4500米种植推广。


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